
一、提取的核酸得率低的问题
1.样品量与试剂的配比要控制在一定范围,避免超过裂解能力。
2.破碎研磨的步骤处理细节很重要,一定要充分研磨,这是核酸提取的条件。
3.在洗脱的步骤,使用足量的洗脱液洗脱并充分混匀,避免有团块wjdtpod残存。
4.实验耗材要匹配,如不同的吸附柱或磁珠的核酸吸附能力不同,也会影响核酸的得率。
二、提取核酸出现降解的问题
1.提取的样品量要符合试剂的配比,尽量控制样品量达到合适比例。
2.每个步骤都要注意充分的混合均匀,避免团块的残留影响实验结果。
3.在洗脱时,时间过长或者温度过高,核酸有可能会降解。
4.样本切记不可反复冻融,提取的样本要注意在合适的温度保存,长期保存尽量-80℃。
三、提取到的核酸纯度不够高的问题
1.样本量和裂解液等试剂的配比要尽量控制到合适的范围。
2.混合均匀以确保裂解充分和没有团块残留。
3.晾干的步骤要充分,否则可能会导致醇类等杂质的残留。
4.磁棒振荡幅度太小或混合时间太短,磁珠上有杂质残留会影响磁珠吸附核酸的能力。
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